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培養基選擇與優化是細胞培養的重要步驟之一,它直接影響到細胞的生長、增殖和功能表達。那么我們該如何選擇與優化細胞培養基呢?讓我們一起來看看吧!一、培養基選擇:1.細胞類型:根據細胞的來源和種類選擇合適的培養基。不同類型的細胞有著不同的營養需求和生長特性,因此需要選擇能夠滿足其需求的培養基。常見的培養基有DMEM、RPMI1640、MEM等。2.營養需求:細胞通過培養基中的成分來獲取所需的營養物質。根據細胞的需求,可以調整培養基的氨基酸、脂類、無機鹽等成分的配比和濃度。3.補充物...
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你知道原代培養和傳代培養主要區別是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、原代培養原代培養即第一次培養,是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養,中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義:1.養物一經接種到培養器皿(瓶)中就不再分割,任其生長繁殖;2.原代培養中的“代”并非細胞的“代”數,因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞;3.原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液,也不等于不更換培養器皿。正常細胞培養的世代數有限,只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉...
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細胞分離是將混合細胞群體中的目標細胞分離出來的過程,常用于細胞治療產品工藝流程中。那么你知道細胞分離技術和策略是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、離心法:差速離心:通過控制離心速度和時間,利用細胞的不同沉降速度分離出不同細胞類型。密度梯度離心:使用密度梯度介質(如離心膜過濾器或離心管)來實現細胞的分層和分離,根據細胞密度的差異進行分離。二、流式細胞術:免疫細胞分選法:利用細胞表面標記物和特定的熒光標記物,通過細胞與熒光抗體的結合來實現細胞的分選和分離。磁珠分離法:通過將特定靶向...
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RNA是目前發現細胞內生物功能zui豐富多樣的生物大分子,同時是DNA與蛋白質信息傳遞的橋梁,因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段。那么你知道RNA提取的關鍵點在哪嗎?讓我們一起來看看吧!所有RNA的提取過程中都有五個關鍵:①樣品細胞或組織的有效破碎;②有效地使核蛋白復合體變性解離,釋放出RNA;③對RNA酶的有效抑制;④有效地將RNA從DNA和蛋白質混合物中分離;⑤對于多糖含量高的樣品還要采取措施有效去除多糖雜質。但其中最關鍵的是抑制RNA酶的活性。RNA酶...
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不同組織RNA提取原理是將細胞裂解,釋放出RNA,并通過不同方式去除蛋白,DNA等雜質,最終獲得高純度RNA產物的過程。常用的RNA提取方法是Trizol方法,Trizol內含異硫氰酸胍能迅速破碎細胞,同時使核蛋白復合體中的蛋白變性并釋放出核酸,由于釋放出的DNA和RNA在特定pH值下的溶解度不同,且分別位于中間相和水相,從而使DNA和RNA得到分離,取出水相后,通過有機溶劑(氯仿)抽提及異丙醇沉淀,可得到純凈RNA。那么你知道RNA提取的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一...
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