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2023-913
你知道什么是原代細胞培養，和細胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細胞培養原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的shou次培養，也叫初代培養。原代培養離體時間短，遺傳性狀和體內細胞相似，適于做細胞形態、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。一、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細胞絕對...
查看更多2023-912
對照的目的是對檢測的各個環節進行監控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。那么我們應該如何選擇熒光定量PCR中的對照呢？讓我們一起來看看吧！一、陽性對照和陰性對照陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進行了提取和擴增最終獲得了陽性結果和陰性結果。陰陽性對照強調處理過程與樣品一致，并且有明確的預期結果。二、擴增對照我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準確的定義應該是擴增陽性...
查看更多2023-912
熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應用嗎？讓我們一起來看看吧！一、分子生物學研究1.核酸定量分析：對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉基因動植物基因拷貝數的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2.基因表達差異分析：比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差...
查看更多2023-911
細胞低溫凍存是培養室常用技術。那么你知道細胞凍存的原理和實驗步驟嗎？讓我們一起來看看吧！原理：將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內的晶體形成，減少細胞內水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷。上述要求可通過下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細胞內水分離開細胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細胞，降低高濃度鹽對冰中蛋白質變性的...
查看更多2023-911
細胞低溫凍存是培養室常用技術。原理是將細胞放在-196℃液氮中，可以使細胞暫時脫離生長狀態，減少細胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。那么細胞凍存有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、DMS0稀釋時會釋放大量熱量，不能直接加到細胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細胞培養級別的；二、緩慢冷凍，細胞逐步脫水，不會因產生大的冰晶而受到損害；三、選擇細胞生長良好、密度約為80-90%、活力達90%以上的細胞凍存；四、凍存時細胞密度少于5X105個活細胞/mL時，很難成功復蘇；五、...
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