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胎牛血清(FBS)是最chang用的血清添加劑,因為它富含生長因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅,但許多細胞系未必適用,并且存在費用較高和生長較慢等缺點。那么,研究人員在評估FBS的質量時,需要注意些什么呢?目前,市場上存在著不同等級的FBS。由于FBS關乎細胞活力和實驗重復性等重要的參數,故在質量方面是絕對不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧!一、可追溯性對于科學家而言,最大的風險也許是FBS的純度大打折扣,這可能導致細胞培養實驗的效...
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分子生物學實驗室的有毒試劑,你知道多少?一起來看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO,用途廣泛,用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機溶劑的極為重要的非質子極性溶劑。對皮膚有極qiang的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也可作為農藥的添加劑。也是一種十分重要的化學試劑。DMSO也是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產物的通透性。但是研究表明,DMSO存在...
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類器是一種類似器官但又不是器官的3D細胞團結構。通過在體外培養胚胎或成體干細胞,讓其增殖分化形成具有一定形態結構及功能的類似于器官的3D細胞團結構。這些細胞結構雖然不是真正意義上的人類器官,但能在某些結構和功能上模擬真實器官,因此,把這些微型人造器官命名為:類器官(organoids)。類器官技術都有哪些應用?讓我們一起來看看吧!一、基因編輯技術在類器官研究中的應用CRISPR-Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御,可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。...
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測序,測的是DNA的序列,也就是測定DNA中脫氧核糖核苷酸的排列順序,它是將DNA化學信號轉變為計算機可處理的數字信號的一個過程,我們能從這些經過科學計算得出的數字信號中找尋到生命之間的奧秘。根據測序技術出現的時間以及讀長、通量等特征,分為一代測序、二代測序、三代測序。下面的這些測序方法,你知道嗎?讓我們一起來看看吧!一、一代測序一代測序技術,也被稱為Sanger測序。其利用了雙脫氧核苷酸會終止PCR的原理。比如:一條序列為ATCGCTA,我們進行3次的雙脫氧核苷酸,第一次加...
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由于二代測序讀長的限制,不可能一下將一個很長的基因序列測通,因此需要先將長基因序列隨機片段化成小片段,這樣的話,這些片段就可以覆蓋整個基因組。所以需要構建文庫。一、文庫構建的步驟文庫構建大致步驟類似,但是各有各自du特的點,例如,RNAseq里miRNA,lncRNA,mRNA方法各有差異,具體方法以后有機會再補充。這里以Illumina的PE文庫為例,其流程圖如下圖。二、文庫構建詳細步驟(1)DNA片段化(FragmentDNA)使用超聲、酶或者加熱的方式將DNA樣品打碎成...
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